谈谈肿瘤免疫：B7-H3

前言

在细胞免疫反应中，T细胞的增殖和活化不仅需要T细胞受体TCR识别APC或肿瘤细胞表面MHC提呈的第一信号，还需要共刺激分子提供的第二信号。B7－CD28超家族是目前发现的共刺激分子家族之一，属于免疫球蛋白超家族。

B7－H3，尽管最初人们发现它能刺激T细胞反应和IFN－γ的产生，但大多数文献认为它与T细胞的抑制有关。由于其在肿瘤免疫逃避中的作用，B7－H3已成为新的免疫治疗靶点。更有趣的是，研究表明B7－H3在肿瘤进展中除了免疫逃避外，在其它方面，包括侵袭和迁移、血管生成以及通过表观遗传修饰物进行基因调控上还起着重要作用。

目前，B7－H3靶向免疫治疗策略已经在多种癌症类型中进行了测试。B7－H3靶向策略的广泛适用性还表现在所测试的多种效应器机制：阻断抗体、放射性同位素结合、ADC、双特异性、三特异性和Fc增强的B7－H3单抗，以及B7－H3特异性CAR－T细胞。

B7－H3的结构与功能

B7－H3（又称CD276）是一种I型跨膜蛋白，属于B7免疫共刺激和共抑制家族，其确切的生物学功能尚不清楚，然而，它似乎同时作为共刺激分子和／或共抑制分子，取决于所涉及的免疫细胞和微环境条件。

在人类中，它由染色体15q24编码，由一个胞外区、一个跨膜区和一个短的胞内区组成，没有已知的信号基序。B7－H3存在两种亚型：2IgB7－H3由一对免疫球蛋白可变区（IgV）样和免疫球蛋白恒定区（IgC）样胞外结构域组成，4IgB7－H3包含两对相同的IgV样和IgC样胞外结构域，后者是人类细胞的主要亚型。

B7－H3的确切功能和受体尚未阐明。在非恶性组织中，B7－H3通过调节T细胞功能在适应性免疫中发挥重要作用。尽管早期的研究支持B7－H3作为激活T细胞所必需的共刺激分子的观点，但最近的研究表明，B7－H3在适应性免疫中具有主要的抑制作用，抑制T细胞激活、增殖和效应细胞因子的释放，主要是IFN－γ和IL－2。

B7－H3在TME中的作用似乎更为复杂。

在小鼠中，B7－H3似乎具有由CD8＋T细胞和NK细胞活化介导的抗肿瘤功能，可能通过与CD8＋T细胞上的Trem样转录物2（TLT－2）受体结合。令人惊讶的是，在人类中，只有三项研究显示B7－H3高表达与改善预后之间存在相关性。相反，有压倒性的证据表明B7－H3具有促肿瘤的作用。事实上，大量临床前和临床证据表明B7－H3通过多种机制抑制特肿瘤抗原异性免疫应答，包括降低免疫细胞肿瘤浸润密度、抑制NK细胞介导的肿瘤细胞溶解、增加调节性T细胞浸润、减少效应细胞因子的释放和抑制主要转录因子的表达；上述机制导致侵袭性癌症生物学和转移潜能，最终预后不良。

最后，B7－H3似乎也通过非免疫功能促进癌症进展，例如通过增加癌细胞的迁移、侵袭和转移潜能，通过增强化疗耐药性，以及通过促进促肿瘤癌细胞代谢谱。

B7－H3的表达

B7－H3在正常组织中限制性表达

大量正常组织的免疫组化（IHC）分析显示， B7－H3仅在少数组织中低表达，甚至检测不到。用B7－H3特异性单克隆抗体对美国Biomax公司的组织芯片进行染色，结果仅对唾液腺腺泡细胞、胃上皮细胞和肾上腺细胞有弱细胞质染色。在其它的研究中，也只观察到胃、胆囊、前列腺、子宫颈和子宫内膜的基底侧膜的弱染色。

B7－H3在原发性恶性肿瘤中广泛表达

多项研究显示，B7－H3在肾细胞癌中的表达率为33．0％，在肝细胞癌中为91．8％。值得注意的是，肾细胞癌和血液系统恶性肿瘤的B7－H3表达频率最低（分别为33．0％和36．7％，p＜0．001），而所有其他实体癌类型的B7－H3表达频率至少为52．3％。在胃肠道肿瘤中，肝细胞癌的B7－H3表达频率最高（91．8％），胃癌的B7－H3表达频率最低（58．0％）。在泌尿生殖系统恶性肿瘤中，肾细胞癌的B7－H3表达频率最低，而卵巢癌的B7－H3表达频率最高（88．3％）。当所有癌症被包括在内时，B7－H3阳性的累积频率为59．5％（15877／26703）。

除了在癌细胞上高表达外，B7－H3还在肿瘤微环境中的基质成纤维细胞和肿瘤相关血管（TAV）上高表达，这种表达模式可能允许B7－H3靶向治疗甚至消除那些没有检测到B7－H3表达的癌细胞。

B7－H3的抗体靶向治疗

目前，有超过20项临床试验已经或正在测试B7－H3靶向单克隆抗体免疫治疗策略的安全性和有效性。

B7－H3靶向放射免疫疗法

131I标记的单克隆抗体8H9（omburtamab，Y－mAbs）已用于转移性中枢神经系统神经母细胞瘤（NCT00089245）患者和促结缔组织增生性小圆细胞瘤（NCT01099644）患者的腹腔注射，并且耐受性良好。同样，在弥漫性脑桥胶质瘤（NCT01502917）中测试了124I标记的单克隆抗体8H9，同样耐受性良好。

特异性单抗与化疗药物结合

例如，MGC018（人源化B7－H3抗体偶联药物，具有可切割的连接子与多卡霉素有效载荷，MacroGenics）目前正在I／II期试验中（NCT03729596）。此外，DS7300a（Daiichi Sankyo）是另外一种ADC，由B7－H3特异性单抗与四拓扑异构酶I抑制剂偶联而成，目前正在进行I／II期试验（NCT04145622）。

Fc增强的单克隆抗体

在该治疗类别中，enoblituzumab（MGA271，MacroGenics）是一种完全人源化的单抗，含有一个Fc结构域，通过增加其与活化受体CD16A的结合并减少其与抑制受体CD32B的结合来增强其抗肿瘤功能，在两个I期试验中发现（NCT01391143，NCT02475213）具有良好的耐受性和安全性。enoblituzumab联合ipilimumab治疗非小细胞肺癌和黑色素瘤（NCT02381314）的I期试验和评估新辅助enoblituzumab治疗前列腺癌（NCT02923180）的II期试验的结果尚待确定。

T细胞导向疗法

迄今为止，只有obrindamab（MGD009，MacroGenics），一种人源化的CD3xB7－H3－BsAb在晚期B7－H3表达肿瘤（NCT02628535）中进行了试验，只引起了简单的短期肝脏不良事件，可能是由于T细胞活化增加引起的细胞因子释放综合征。

靶向CAR－T

已经进入临床阶段，目前正在2项针对胶质母细胞瘤（NCT04077866）和儿童胶质瘤（NCT04185038）的试验中进行评估。

靶向单／双抗

许多B7－H3靶向单抗策略目前正在临床前研究中开发。包括B7－H3阻断性单抗与检查点抑制剂的联合应用，但由于B7－H3受体的有限信息和缺乏人类B7－H3特异性阻断性单克隆抗体，阻碍了向临床的转化。

新型B7－H3靶向Fc增强单抗以及bsAb也正在开发中。例如，一种新的Fc增强的双特异性抗B7－H3单克隆抗体／PD－1融合蛋白在乳腺癌小鼠模型中显示出良好的结果，而B7－H3xCD3 的双抗在体外对血液恶性细胞也显示出强大的细胞毒性。

靶向三特异性杀伤接合器（TriKEs）

TriKEs由3个不同特异性的单链抗体或2个单链抗体（CD16特异性和TA特异性）和一种细胞因子（如IL－15）组成。B7－H3特异性的单链抗体与抗CD16单域抗体产生了B7－H3／CD16／IL－15三联体，在体外和小鼠试验中，针对头颈部鳞状细胞癌、PDAC和卵巢癌的肿瘤负荷显著降低。同时，第二代TriKE，其中人IL－15作为抗B7－H3单链抗体和CD16抗体之间的修饰交联剂。后者可以改善IL15部分的功能，诱导强大而特异的NK细胞增殖，并在体外和小鼠体内有效地消除卵巢癌细胞。

小结

尽管B7－H3及其受体的确切功能尚待阐明，但目前的文献综述和综合分析令人信服地表明，B7－H3在所有类型的癌症中高度表达，但在正常组织中的分布有限，因此是一个有效的安全靶点。目前，包括单抗、双抗、ADC、CAR－T等多种B7－H3的靶向免疫治疗策略已经被开发出来并在临床试验中进行了测试，并且展现出良好的应用前景，是一个非常有吸引力的靶点。

参考文献：

1．B7－3 targetedantibody－based immunotherapy of malignant diseases． Expert Opin Biol Ther． 2020Dec 21；1－16．

2．B7－H3 role in theimmune landscape of cancer． Am J Clin Exp Immunol． 2017； 6（4）： 66–75．

3．NK－Cell－MediatedTargeting of Various Solid Tumors Using a B7－H3 Tri－Specific Killer Engager InVitro and In Vivo． Cancers （Basel）． 2020 Sep 18；12（9）：2659．